1. Mērķis: Šīs procedūras mērķis ir nodrošināt standartizētu procedūru aseptiskām darbībām un sterilu telpu aizsardzībai.
2. Pielietojuma joma: bioloģiskās testēšanas laboratorija
3. Atbildīgā persona: kvalitātes kontroles uzraugs testētājs
4.Definīcija: Nav
5. Drošības pasākumi
Stingri veiciet aseptiskas darbības, lai novērstu mikrobu piesārņojumu; operatoriem pirms ieiešanas sterilā telpā jāizslēdz UV lampa.
6. Procedūras
6.1. Sterilai telpai jābūt aprīkotai ar sterilu operāciju zāli un bufertelpu. Sterilas operāciju zāles tīrības klasei jābūt 10000. Iekštelpu temperatūrai jābūt 20–24 °C robežās, un mitrumam jābūt 45–60 % robežās. Tīrā sola tīrības klasei jābūt 100.
6.2. Sterila telpa ir jāuztur tīra, un ir stingri aizliegts krāt gružus, lai novērstu piesārņojumu.
6.3. Stingri novērsiet visu sterilizācijas iekārtu un barotņu piesārņošanu. Tiem, kas ir piesārņoti, jāpārtrauc to lietošana.
6.4. Sterilai telpai jābūt aprīkotai ar darba koncentrācijas dezinfekcijas līdzekļiem, piemēram, 5% krezola šķīdumu, 70% spirtu, 0,1% hlormetionīna šķīdumu utt.
6.5. Sterilās telpas regulāri jāsterilizē un jātīra ar atbilstošu dezinfekcijas līdzekli, lai nodrošinātu, ka sterilās telpas tīrība atbilst prasībām.
6.6. Visi instrumenti, instrumenti, trauki un citi priekšmeti, kas jāienes sterilā telpā, cieši jāiesaiņo un jāsterilizē, izmantojot atbilstošas metodes.
6.7. Pirms ieiešanas sterilā telpā personālam jānomazgā rokas ar ziepēm vai dezinfekcijas līdzekli un pēc tam bufertelpā jāpārģērbjas speciālā darba apģērbā, apavos, cepurēs, maskās un cimdos (vai vēlreiz jānoslauka rokas ar 70% etanolu). Darbības jāveic baktēriju kamerā.
6.8. Pirms sterilās telpas lietošanas ultravioletā lampa sterilajā telpā jāieslēdz apstarošanai un sterilizēšanai ilgāk par 30 minūtēm, un vienlaikus jāieslēdz tīrais galds gaisa pūšanai. Pēc operācijas pabeigšanas sterilā telpa savlaicīgi jātīra un pēc tam 20 minūtes jāsterilizē ar ultravioleto gaismu.
6.9. Pirms pārbaudes testa parauga ārējais iepakojums jāuzglabā neskarts un to nedrīkst atvērt, lai novērstu piesārņojumu. Pirms pārbaudes ārējās virsmas dezinficēšanai izmantojiet 70% spirta vates bumbiņas.
6.10. Katras darbības laikā jāveic negatīva kontrole, lai pārbaudītu aseptiskas darbības uzticamību.
6.11. Baktēriju šķidruma absorbēšanai jāizmanto piesūcekņa lodīte. Nepieskarieties salmiņam tieši ar muti.
6.12. Inokulācijas adata pirms un pēc katras lietošanas reizes jāsterilizē ar liesmu. Pēc atdzesēšanas kultūru var inokulēt.
6.13. Salmiņi, mēģenes, Petri trauciņi un citi piederumi, kas satur baktēriju šķidrumu, dezinfekcijai jāiemērc sterilizācijas spainī ar 5 % lizola šķīdumu un pēc 24 stundām jāizņem un jānoskalo.
6.14. Ja uz galda vai grīdas ir izlijis bakteriāls šķidrums, nekavējoties uz piesārņotās vietas vismaz 30 minūtes jāuzlej 5 % karbolskābes šķīdums vai 3 % lizola šķīdums. Ja darba apģērbs un cepures ir piesārņotas ar bakteriālu šķidrumu, tās nekavējoties jānovelk un pēc augstspiediena tvaika sterilizācijas jāizmazgā.
6.15. Visi priekšmeti, kas satur dzīvas baktērijas, pirms skalošanas zem krāna ir jādezinficē. Kanalizācijas piesārņošana ir stingri aizliegta.
6.16. Koloniju skaits sterilā telpā jāpārbauda katru mēnesi. Ar atvērtu tīru darba virsmu paņemiet vairākus sterilus Petri trauciņus ar iekšējo diametru 90 mm un aseptiski ievadiet apmēram 15 ml barības vielu agara kultūras barotnes, kas ir izkausēta un atdzesēta līdz aptuveni 45°C. Pēc sacietēšanas novietojiet to otrādi 30–35°C temperatūrā. Inkubējiet 48 stundas ℃ inkubatorā. Pēc sterilitātes pārbaudes paņemiet 3 līdz 5 plāksnes un novietojiet tās darba pozīcijas kreisajā, vidū un labajā pusē. Pēc vāka atvēršanas un 30 minūšu ekspozīcijas novietojiet tās otrādi 30–35°C temperatūrā inkubatorā uz 48 stundām un izņemiet. Pārbaudiet. Vidējais dažādu baktēriju skaits uz plāksnes 100. klases tīrā telpā nedrīkst pārsniegt 1 koloniju, un vidējais skaits 10000. klases tīrā telpā nedrīkst pārsniegt 3 kolonijas. Ja ierobežojums tiek pārsniegts, sterilā telpa ir rūpīgi jādezinficē, līdz atkārtotas pārbaudes atbilst prasībām.
7. Skatiet nodaļu (Sterilitātes pārbaudes metode) sadaļās "Zāļu higiēniskās pārbaudes metodes" un "Ķīnas standarta darbības prakse zāļu pārbaudei".
8. Izplatīšanas nodaļa: Kvalitātes vadības nodaļa
Tīrās telpas tehniskās vadlīnijas:
Pēc sterilas vides un sterilu materiālu iegūšanas mums ir jāuztur sterils stāvoklis, lai pētītu konkrētu zināmu mikroorganismu vai izmantotu tā funkcijas. Pretējā gadījumā dažādi mikroorganismi no ārpuses var viegli sajaukties. Mikrobioloģijā parādību, kad sajaucas dažādi mikroorganismi no ārpuses, sauc par piesārņojošām baktērijām. Piesārņojuma novēršana ir kritiska metode mikrobioloģiskajā darbā. Pilnīga sterilizācija, no vienas puses, un piesārņojuma novēršana, no otras puses, ir divi aseptiskās tehnikas aspekti. Turklāt mums ir jānovērš pētāmo mikroorganismu, īpaši patogēnu mikroorganismu vai ģenētiski modificētu mikroorganismu, kas dabā neeksistē, izkļūšana no mūsu eksperimentālajiem traukiem ārējā vidē. Šiem nolūkiem mikrobioloģijā ir daudz pasākumu.
Sterila telpa parasti ir neliela telpa, kas speciāli iekārtota mikrobioloģijas laboratorijā. To var būvēt no loksnēm un stikla. Platībai nevajadzētu būt pārāk lielai, apmēram 4-5 kvadrātmetriem, un augstumam jābūt apmēram 2,5 metriem. Ārpus sterilās telpas jāierīko bufertelpa. Bufertelpas durvīm un sterilās telpas durvīm nevajadzētu būt vērstām vienā virzienā, lai novērstu gaisa plūsmas iekļūšanu dažādās baktērijās. Gan sterilajai telpai, gan bufertelpai jābūt hermētiskām. Iekštelpu ventilācijas iekārtām jābūt aprīkotām ar gaisa filtrācijas ierīcēm. Sterilas telpas grīdai un sienām jābūt gludām, netīrumiem nepiesātinātām un viegli tīrāmām. Darba virsmai jābūt līdzenai. Gan sterilā telpa, gan bufertelpa ir aprīkotas ar ultravioletajiem lukturiem. Ultravioletie lukturi sterilajā telpā atrodas 1 metra attālumā no darba virsmas. Personālam, kas ienāk sterilajā telpā, jāvalkā sterilizēts apģērbs un cepures.
Pašlaik sterilas telpas pārsvarā pastāv mikrobioloģijas rūpnīcās, savukārt vispārējās laboratorijās tiek izmantoti tīrie galdi. Tīrā galda galvenā funkcija ir izmantot lamināru gaisa plūsmas ierīci, lai noņemtu dažādus sīkus putekļus, tostarp mikroorganismus, no darba virsmas. Elektriskā ierīce ļauj gaisam iziet cauri HEPA filtram un pēc tam iekļūt darba virsmā, lai darba virsma vienmēr būtu pakļauta plūstoša sterila gaisa kontrolei. Turklāt sānos, tuvāk ārējai pusei, ir ātrgaitas gaisa aizkars, lai novērstu ārēja baktēriju gaisa iekļūšanu.
Vietās ar sarežģītiem apstākļiem tīra galda vietā var izmantot arī koka sterilās kastes. Sterilajai kastei ir vienkārša struktūra un to ir viegli pārvietot. Kastes priekšpusē ir divi caurumi, kurus nedarbojoties bloķē stumjamas-velkamas durvis. Darbības laikā var izstiept rokas. Priekšpuses augšdaļa ir aprīkota ar stiklu, lai atvieglotu iekšējo darbību. Kastes iekšpusē ir ultravioletā lampa, un piederumus un baktērijas var ievietot caur mazām durvīm sānos.
Aseptiskām operāciju metodēm pašlaik ir ne tikai izšķiroša nozīme mikrobioloģiskajos pētījumos un pielietojumos, bet tās tiek plaši izmantotas arī daudzās biotehnoloģijās. Piemēram, transgēnajā tehnoloģijā, monoklonālo antivielu tehnoloģijā utt.
Publicēšanas laiks: 2024. gada 6. marts